测定饲料中单宁的方案（分光光度法）

测定饲料中单宁的方案（分光光度法）

引言目前，“饲料禁抗”已成为全球畜牧业生产的趋势，对提高畜产品质量安全、增加绿色优质畜产品供给、降低养殖生产成本、促进畜产品出口、实现畜牧业可持续发展意义深远。单宁作为替抗产品在动物生产中的应用具有一定的可行性。

关键词  单宁  分光  美析

原理

用丙酮溶液提取饲料中单宁类化合物,经过滤后,取滤液加钨酸钠-磷钼酸混合溶液和碳酸钠溶液，显色后,以试剂为空白对照,用分光光度计于760 nm波长处测定吸光度值,用单宁酸作标准曲线测定饲料中单宁含量。

仪器及试剂

美析UV-1500紫外可见分光光度计:带10 mm比色皿,可在760 nm处测定。

电子天平:感量为0. 1 mg.

粉碎机。

振荡仪。

单标线吸管:1 mL,10 mL,50 mL,A 级。刻度吸管:5 mL。

容量瓶:50 mL,100 mL,200 mL,A级。具塞三角瓶:250 mL。

中速定量滤纸。

除非另有说明,本标准中所用试剂均为分析纯,水符合GB/T 6682三级用水规定。

钨酸钠(Na₂O₄W·2H₂O).

磷钼酸(H₂Mo₁₂O₄₀P·XH₂O)。

钨酸钠-磷钼酸混合溶液:称取100.0 g 钨酸钠、20.0 g磷钼酸,溶于约750 mL水中，移入1000 mL回流瓶中,加入50 mL磷酸,充分混匀,接上冷凝管,在沸水浴上加热回流2h,冷却,转入1000 mL容量瓶中,用水定容至刻度﹐摇匀,过滤﹐置棕色瓶中保存。室温下可保存14 d。

无水碳酸钠(Na₂CO₃)。

碳酸钠溶液(75 g/L):称取37.5 g无水碳酸钠，溶于250 mL温水中,混匀,冷却,稀释至500 mL,过滤到储液瓶中备用。室温下可保存7d.

丙酮(C₃H₆O)。

丙酮溶液(1＋1,体积比):分取等体积的水和丙酮(4.6),等体积混合,摇匀,即得。

单宁酸标准品(C₇₆ H₅₂O₄₆):含量≥95.0%。

单宁酸标准储备液:称取单宁酸标准品适量(精确到0.0001g),加适量水溶解,用水定容至100 mL,摇匀,制成单宁酸质量浓度约为1 mg/mL的标准储备液。在冰箱中4℃可保存5d。

单宁酸标准使用液;精密量取单宁酸标准储备液10.00 mL,置 200 mL容量瓶中,用水定容至200 mL,摇匀。此溶液单宁酸质量浓度为50 mg/L,用时现配。

试样制备

按GB/T 14699.1采样,按GB/T 20195制备试样,磨碎,通过0.45 mm孔筛,混匀,装入密闭容器中,避光低温保存备用。

分析步骤

试液的制备

称取试样1 g~2 g(精确至0.000 1 g),置于250 mL具塞三角瓶中,精密加入丙酮溶液50.00 mL,加塞密封,置振荡仪上振摇40 min,静置,用中速定量滤纸过滤,弃去初滤液,续滤液供测定用。

测定

标准曲线的绘制

精密量取单宁酸标准使用液0.00 mL,0.50 mL,1.00 mL,2.00 mL,3.00 mL,4.00 mL、5.00 mL和6.00 mL,分别置盛有约30 mL水的50 mL容量瓶中,摇匀;加钨酸钠-磷钼酸混合溶液2.5 mL,加碳酸钠溶液5.0 mL,摇匀;分别用水定容至50 mL,播匀。单宁酸标准溶液浓度分别为0.00 mg/L,0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L,3.00 mg/L、4.00 mg/L,5.00 mg/L和6.00 mg/L,放置30 min显色后,以标准曲线0.00 mg/L为空白,在760 nm波长处测定标准溶液的吸光度,以单宁酸浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。

试样的测定

精密量取试液1.00 mL,置盛有约30 mL水的50 mL容量瓶中,摇匀;加钨酸钠-磷钼酸混合溶液2.5 mL,加碳酸钠溶液5.0 mL,摇匀;用水定容至50 mL,摇匀。放置30 min显色后，以标准曲线0.00 mg/L为空白,在760 nm波长处测定试样溶液的吸光度,根据标准曲线求出试液中单宁酸的浓度。如果吸光度值超过6.00 mg/L单宁酸的吸光度时,将试液稀释后重新测定。

计算和结果的表述

试样中单宁(以单宁酸计)的含量X,以质量分数表示,单位为毫克每千克(mg/kg),按式计算。

式中:

c——试样测定液中单宁酸的浓度,单位为毫克每升(mg/L);

v——试样定容体积,单位毫升(mL);

D——试样稀释倍数;

m——试样质量,单位为克(g)。

仪器参数

关于我们

上海美析仪器公司简介

上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。

      美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。

美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。

（美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业，更通过了CE认证、FCC认证、RoHS认证以及国内多项资质审查认证，并有着多项自行研发的光谱类专利版权等等）