原子吸收光谱法（火焰）测定葡萄酒中铁的方法验证

关键词：铁；葡萄酒；方法验证；美析集团 www.macylab.com；AA-1800

  随着人民生活水平的不断提高，葡萄酒正在向着营养型，健康型，保健型的方向发展，葡萄酒已经逐渐走向普通消费者家庭，并成为普通大众所喜欢的果酒之一。葡萄酒在贮藏的过程中，由于铁等金属离子超标的影响,会使酒体产生浑浊或沉淀。因此,如何控制铁等金属离子的含量,对于保证葡萄酒的稳定性显得尤为重要。葡萄酒中铁含量的测定方法按照GB5009.90-2016《食品安全国家标准食品中铁的测定》第一法火焰原子吸收光谱法对其所涉及的测量范围、线性范围、检出限、定量限、精密度、正确度六个方法参数[1]检测以确保分析数据的准确性、科学性和严密性。

一、材料与方法

1.1试剂

除非另有说明,本方法所用试剂均为优级纯,水为GB/T6682规定的二级水。

1.1.1硝酸(HNO3)。

1.1.2硝酸溶液(5+95):量取50mL硝酸,倒入950mL水中,混匀。

1.1.3铁标准储备液(1000mg/L)

1.1.4铁标准中间液(100mg/L):准确吸取铁标准储备液(1000mg/L)5mL于50mL容量瓶中加硝酸溶液

(5+95)定容至刻度,混匀。

1.1.5铁标准系列溶液:分别准确吸取铁标准中间液(100mg/L)0.00mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、

4.00mL于100mL容量瓶中,加硝酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀。此铁标准系列溶液中铁的质量浓度分别

为0mg/L、0.20mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L。

注:可根据仪器的灵敏度及样品中铁的实际含量确定标准溶液系列中铁的具体浓度。

1.2仪器

注:所有玻璃器皿及聚四氟乙烯消解内罐均需硝酸溶液(1+5)浸泡过夜,用自来水反复冲洗,最后用水冲洗干净。

1.2.1原子吸收光谱仪:配火焰原子化器,铁空心阴极灯。美析集团 www.macylab.com

1.2.2微波消解仪:配聚四氟乙烯消解内罐。

1.3方法

采用国家标准GB5009.90-2016《食品安全国家标准食品中铁的测定》第一法火焰原子吸收光谱法。

1.4原理

试样消解后,经原子吸收火焰原子化,在248.3nm处测定吸光度值。在一定浓度范围内铁的吸光度值与铁含量成正比,与标准系列比较定量。

1.5分析步骤

1.5.1试样制备

注:在采样和制备过程中,应避免试样污染。

1.5.1.1粮食、豆类样品去除杂物后,粉碎,储于塑料瓶中。

1.5.1.2蔬菜、水果、鱼类、肉类等样品用水洗净,晾干,取可食部分,制成匀浆,储于塑料瓶中。

1.5.1.3饮料、酒、醋、酱油、食用植物油、液态乳等液体样品将样品摇匀。

此次选取葡萄酒作为样品,进行铁含量测定的验证试验。

1.5.2试样消解微波消解

准确移取液体试样5.00mL于微波消解罐中,加入5mL硝酸,按照微波消解的操作步骤消解试样,消解条件参考表1。冷却后取出消解罐,在电热板上于140℃~160℃赶酸至1.0mL左右。冷却后将消化液转移至50mL容量瓶中,用少量水洗涤内罐和内盖2~3次,合并洗涤液于容量瓶中并用水定容至刻度,混匀备用。同时做试样空白试验。

1.5.3标准工作曲线的制作：将标准系列工作液按质量浓度由低到高的顺序分别导入火焰原子化器,测定其吸光度值。以铁标准系列溶液中铁的质量浓度为横坐标,以相应的吸光度值为纵坐标,制作标准曲线。

1.5.4试样的测定：在与测定标准溶液相同的实验条件下,将空白溶液和样品溶液分别导入原子化器,测定吸光度值,与标准系列比较定量。

二、结果与分析

2.1测量范围

依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法和确认指南》中5.2测量范围的验证方法，对本方法的测量范围进行验证，对0.50mg/L铁标准溶液、1.00mg/L铁标准溶液、2.00mg/L铁标准溶液三个不同浓度的标准溶液进行6次检测分析，其结果具体如下：

2.1.1试验所得标准曲线线性回归方程的相关系数为0.9991，结果（见表2标准曲线线性）符合GB/T27417-2017中对于准确定量方法，线性回归方程的相关系数不低于0.99的要求。

2.1.2精密度以不同浓度的铁标准溶液6次检测结果值的室内变异系数表示，其结果（见表3标准溶液变异系数及正确度结果表）符合GB/T27417-2017中被测组分含量为10mg/kg时实验室内变异系数为7.5%的要求。

2.1.3正确度以不同浓度的铁标准溶液的回收率来表示，即铁标准溶液6次检测结果的平均值与已知浓度的比值，其结果（见表3标准溶液变异系数及正确度结果表）符合GB/T27417-2017中被测组分含量为1~100mg/kg时方法回收率在90%~110%的要求。

2.2线性范围

依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法和确认指南》中5.3线性范围的验证方法，对本方法的线性范围进行验证，线性回归方程的相关系数为0.9991，结果（见表2标准曲线线性）符合GB/T27417-2017中对于准确定量方法，线性回归方程的要求。

2.3检出限和定量限

依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法和确认指南》中5.4检出限和定量限的验证方法，采用空白标准偏差法对本方法的检出限进行验证，方法的检出限为空白试验的平均值与3倍的标准偏差之和，方法定量限为方法检出限的3倍。故本方法的方法检出限为0.11mg/L，定量限为0.33mg/L（见表4）

2.4正确度

依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法和确认指南》中5.5正确度的验证方法，采用加标回收的方法对准确度进行验证，结果方法回收率（见表5正确度及精密度结果表）符合GB/T27417-2017中被测组分含量为1~100mg/kg时方法回收率在90%~110%的要求。

2.5精密度

依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法和确认指南》中5.6精密度的验证方法，以不同样品6次检测结果值的室内变异系数表示精密度，其结果（见表5正确度及精密度结果表）符合GB/T27417-2017中被测组分含量为100mg/kg时实验室内变异系数为5.3%的要求。

三、结论

  本次方法验证依据GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法和确认指南》GB5009.90-2016《食品安全国家标准食品中铁的测定》第一法火焰原子吸收光谱法进行方法验证，其检测过程中所涉及的的测量范围、线性范围、检出限和定量限、正确度及精密度六个方法参数均符合GB/T27417-2017和GB5009.90-2016《食品安全国家标准食品中铁的测定》，故方法GB5009.90-2016《食品安全国家标准食品中铁的测定》第一法火焰原子吸收光谱法在本实验室内可用。

四、文献出处及鸣谢
本文主要内容部分出自：1.原子吸收光谱法（火焰）测定葡萄酒中铁的方法验证。蒋祥飞，侯亚伟                                

                                    中图分类号：TS262.6；TS207.3 文献标识码：B