鸡蛋蛋清中溶菌酶的测定(紫外分光法)

鸡蛋蛋清中溶菌酶的测定(紫外分光法)

原理

溶菌酶在281 nm诚处有最大吸收峰。溶菌酶标准品用每升溶教含9g氯化钠的溶液溶解并稀释成不同梯度浓度,在28np波长处测定吸光度并绘制标准曲线,求出标准曲线回归方程。试样经过处理,按溶菌酶标准品测定为法测定试样中的吸光度,根据其吸光度值棚标准曲线回归方程计算试样中溶菌酶含量。

方法依据GB/T 25879—2010

仪器及试剂

美析UV-1700紫外可见分光光度计(波长范围190 nm~900 nm,波长确定性士0.3 nm,波长重复精度±0.1 nm)。

电子分析天平(感量0.1 mg.1 mg)。

离心机(最大离心力2325g,具10 ml离心管)。

溶菌酶标准品,优级纯,活力在20 0o0 U/mg左右。

氯化钠,分析纯。

蒸馏水,按GB/T 6682执行。

医用脱脂纱布。

0.9%氯化钠溶液:称取氯化钠(4.3.2)0.9 g,溶解于蒸馏水中,定容至100 mL。

溶菌酶标准工作液:称取溶菌酶标准品0.500 g,以 0.9%氯化钠溶液溶解定容至1000 mL,得到500 ug/mL 的溶菌酶标准工作液，于4℃密封保存备用,1周内使用。

分析步骤

标准曲线的绘制

分别吸取溶菌酶标准工作液1mL,2 mL,3 ml,4 mL,5mL于25 mL 容量瓶中,以0.9%氯化钠溶液稀释至刻度,混匀。用10mm石英比色皿比色,以0.9%氯化钠溶液为参比溶液,在波长281 nm处依次测定各标准工作液的吸光度﹐以溶菌酶标准工作液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,并求出标准曲线回归方程。

试样测定

鸡蛋蛋清用4层纱布过滤,取过滤试样l mL,用0.9%氯化钠溶液稀释定容至100 mL,混匀,避免起泡沫。吸取5 mL蛋清的氯化钠溶液,1 310g离心5 min,取上清液,按照绘制标准曲线的操作步骤,在波长281 nm 处测定试样溶液的吸光度。平行测定三次,取结果的算术平均值,由标准曲线回归方程计算试样溶液中溶菌酶的浓度。

结果的计算

根据试样溶液吸光度值,用标准曲线回归方程计算试样溶液中溶菌酶的浓度c。鸡蛋蛋清中溶菌酶的含量按式计算:

式中:

X—鸡蛋蛋清中溶菌酶的含量,单位为微克每毫升(ug/mL);

c——试样溶液中溶菌酶的浓度,单位为微克每毫升(ug/mL);

V——试样溶液定容的体积,单位为毫升(mL);

V₁——试样的体积,单位为毫升(mL)。

仪器参数

关于我们

上海美析仪器公司简介

上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。

      美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。

美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。

（美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业，更通过了CE认证、FCC认证、RoHS认证以及国内多项资质审查认证，并有着多项自行研发的光谱类专利版权等等）