标准的PCR实验室设计规范

关键词：超微量分光光度计；核酸提取仪；PCR；美析仪器www.macylab.com；UL-1000

   PCR即聚合酶链式反应，是分子生物学研究和实验的常规方法，也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术。其特点是能将微量的 DNA 大幅增加。实验室分为四个区域，进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出，四区域分别为：
1.试剂配制区
2.样品处理区
3.核酸扩增区
4.产物分析区

 PCR 实验室可以是分散形式，也可以是组合形式。完成一组 PCR 实验，通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程，若实验工艺需要，还应增加样品粉碎过程。

一、分散形式 PCR 实验室
   所谓分散形式 PCR 实验室，是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远，呈分散布置形式。对于这种布置形式的 PCR 实验室，由于各个实验之间不易相互干扰，因此无需特殊条件要求。
二、组合形式 PCR 实验室
   所谓组合形式 PCR 实验室, 是指完成 PCR 四个实验过程的实验用房相邻布置，组成独立实验区域的形式。对于组合形式 PCR 实验室，由于各个实验间集中布置，容易造成相互干扰，因此，对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染；核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品。
如果使用荧光 PCR 仪，扩增室和产物分析室可以合并。
  若房间进深允许，可设 PCR 内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面，缓冲间比专用走廊更有意义。
 
   各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
   PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。需要严格的通风设计，若通风设计不合理，会使风速流向混乱，甚至危害人们健康。
 
进入实验室区域工作人员应该按照以下路径：
公共清洁区——更衣间（更换洁净服）——缓冲间——污染实验区
工作人员退出实验室的路径为：
污染试验区——缓冲间——淋浴间（有条件的可设置）——更衣间——公共清洁区

  标准的PCR实验室设计规范
  1、主体结构
   主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金 50 内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。
 2、标准的三区分隔和气压调节
   将 PCR 过程分成试剂准备、标本制备和 PCR 扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区， 同时各区通过气压调节，使整个 PCR 实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
  可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和 PCR 扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。
3、消毒
   在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。
  在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。
4、机械连锁不锈钢传递窗
   试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。
5、地面
   地面建议使用 PVC 卷材地面或自流坪地面，整体性好。便于进行清扫，耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面，或大块的瓷砖（至少 800mm×800mm）接缝需要小于 2mm。
6、照明
   灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

在建设的过程中应注意：

●规范的安装流程和全面的服务流程。

●严格按照规范科学设计的安装流程。
●安装前需要确定以下安装条件，如：电源电压，电源进线位置，电话网络线进线位置，进水水压，最小安装空间，地面平整度，通风孔、进水管和下水管的位置等，理想状态的空间尺寸和通风口尺寸。

●实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好；所有阴角宜采用圆弧形线条过渡；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

关键词：超微量分光光度计；核酸提取仪；PCR；美析仪器www.macylab.com；UL-1000